Extracción de ADN

La semana pasada fuimos a la UMH para realizar una práctica de biología que consistía en la extracción de ADN de la planta del tomate.

Para ello utilizamos los siguientes materiales:

• Hoja pequeña de la planta del tomate
• Micropipetas
• Tampón de extracción
• SDS (detergente)
• Isopropanol
• Acetato de sodio
• Etanol
• Centrifugadora

Primero escogemos una hoja pequeña y la introducimos en la micropipeta.

Añadimos 250 μl de tampón de extracción.

Triturar con un "palito" para así romper la pared celular y las membranas, añadir otros 250 μl de tampón de extracción.

 

Añadir 35μl de SDS y agitar suavemente e incubar a 65ºC durante 5 minutos.

Incubar a temperatura ambiente durante 5 minutos y centrifugar a 13000 rpm durante 10 minutos.

Pasar el sobrenadante a otra micropipeta y añadir 500 μl de isopropanol y 60 μl de acetato de sodio 3M.

Incubar a temperatura ambiente durante 10 minutos y centrifugar a 13000 rpm durante 10 minutos.

Por último, eliminar el sobrenadante y añadir 300 μl  de etanol al 70%. Observaremos un pequeño precipitado blanco, ese sará el ADN que hemos extraído.